Principio. La urea es hidrolizada por la ureasa produciendo amoníaco y dióxido de carbono.
El amoníaco reacciona con el 2-cetoglutarato y NADH en una reacción catalizada por la glutamato deshidrogenasa (GLDH), promoviendo oxidación del NADH a NAD. La consecuente reducción de la absorbancia medida en 340 nm es proporcional a la concentración de urea en la muestra.
Características del sistema. Existen varios métodos para la determinación de la urea, pero los que utilizan acoplamiento de enzimas son más convenientes y extensivamente usados en los laboratorios clínicos.
El sistema presenta una linealidad hasta 300 mg/dL reduciéndose acentuadamente la repetición de pruebas en valores elevados. El producto de Labtest no sufre interferencias provocadas por valores mediamente elevados de bilirrubina, hemoglobina y triglicéridos.
Las sustancias utilizadas en la reacción se encuentran distribuidas adecuadamente en dos reactivos, al objeto de ofrecer mayor estabilidad en la forma líquida original y mantener las óptimas condiciones operacionales, de modo a permitir la utilización directa de los reactivos en sistemas automáticos.
La metodología monorreactiva puede ser aplicada utilizando un Reactivo de Trabajo estable 28 días bajo refrigeración, obteniéndose un desempeño adecuado incluso en situaciones de bajas demandas de la prueba. El sistema también permite preparar el volumen de Reactivo de Trabajo necesario para una medición de la concentración de la urea.
El método se aplica fácilmente en sistemas automáticos y semiautomáticos capaces de medir absorbancia en 340 nm.