Principio. La muestra de suero es incubada con el Reactivo de Trabajo de la CK-MB, que contiene un anticuerpo específico para la subunidad CK-M y que inhibe completamente la actividad enzimática del monómero CK-M. La actividad del monómero CK-B, que no es inhibida por el anticuerpo, se mide por la siguiente secuencia de reacciones:



La CK-B cataliza la desfosforilación de la creatina fosfato para producir adenosina trifosfato (ATP), que reacciona con la glucosa en presencia de la hexoquinasa (HK), formando glucosa-6-fosfato. La glucosa-6-fosfato, en presencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G-6-PDH), es oxidada a 6-fosfogluconato (6-PG) y reduce el NAD a NADH. La velocidad de incremento en la absorbancia a 340 nm es proporcional a la actividad de la CK-B en la muestra.

Características del sistema. El método se basa en las condiciones de reacción optimizadas por Szasz , que incorporó la activación de la CK con N-acetil cisteína (NAC). El método fue exhaustivamente evaluado por la International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (IFCC) , que recomendó su utilización com las concentraciones de los reactivos más favorables a las condiciones cinéticas y a los aspectos técnicos del sistema de medición.

El sistema CK-MB Liquiform es trazable al método de referencia del IFCC y al material de referencia ERM – AD455/IFCC del Institute for Reference Materials and Measurements. El sistema posee inhibidor competitivo de adenilato quinase para minimizar la obtención de valores falsamente elevados del CKMB.

La utilización del calibrador, que contiene CK-MM y MB humanas, propicia la corrección de la respuesta del sistema de medición, obteniendo así, exactitud deseable de los resultados. La actividad enzimática de la CK en el calibrador es trazable al Procedimiento Primario de Referencia del IFCC y al material de referencia ERM – AD455/IFCC.

El sistema CK-MB Liquiform utiliza la medición en modo cinético y puede ser fácilmente aplicado en analizadores automáticos y semiautomáticos capaces de medir la absorbancia a 340 nm, con aplicación del método birreactivo o monorreactivo.